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Q1:DNA条带模糊。
A1:(1) Marker条带出现降解:请确保在使用过程中避免核酸酶污染;
(2) 电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲也多次使用后,例子浓度降低,ph值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;
(3) 电泳条件不合适:电泳时电压应不超过20V/cm,温度应低于30℃;
Q2:DNA Marker条带不规则,如哑铃型或波浪形。
A2:(1) 电泳缓冲液陈旧:老化的电泳缓冲液离子浓度降低,ph值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;
(2) 电泳条件不合适:电泳时电压应不超多20V/cm,电压太高可能也会导致Marker条带出现不规则现象;
(3) 凝胶质量差以及凝胶冷却时凝固不均匀。
Q3:电泳时,Marker前端的小条带丢失。
A3:使用EB作为核酸染料时,由于EB与DNA的结合力较弱,且EB与DNA的电泳方向相反。电泳时间较长时,DNA条带跑到前面,EB就可能与DNA脱离,从而使条带变弱。因此电泳时将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳。